兽用土霉素具有广谱抗菌作用，对多数革兰阳性菌、阴性菌、立克次体、沙眼衣原体、放线菌及螺旋体等都有效，对伤寒杆菌几乎无效。兽用土霉素主要可用于治疗痢疾、斑疹伤寒、沙眼、结膜炎、肺炎、中耳炎、疖疮及皮肤化脓感染等。此外，土霉素也可用于治疗立克次体病，包括流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、落基山热、恙虫病和Q热，支原体属感染和衣原体属感染等疾病。
此外，土霉素还是一种常用的饲料添加剂，可以促进动物生长和提高饲料转化率。但是需要注意的是，土霉素的使用应该根据兽医的建议合理使用，不能长时间连续使用，以免产生耐药性和副作用。